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進口ELISA試劑盒使用血清提取蛋白是從血清中提取的蛋白質(zhì),適用于食物工業(yè)的食物增加劑和醫(yī)藥制劑。
通常提取蛋白質(zhì)的辦法是離心分離,除掉血漿,使二價鐵血紅素酸化,并將其掃除。但是這種辦法產(chǎn)量很低(100毫升血液僅可提取蛋白質(zhì)約10)克。
為了進步蛋白質(zhì)得率,選用新的辦法,即用每分鐘2 500~3000轉(zhuǎn)的速度 在15~30分鐘內(nèi)將血液進行離心分離,使醋酸和氯化鈉的混合物(比值為2∶1~4∶1)酸化。在溫度90~110℃下加熱5~15分鐘。冷卻,再增加yi醚。
制作辦法:
取經(jīng)過安穩(wěn)的血液,作離心分離15~30分鐘,每分鐘轉(zhuǎn)速為2 500~3000轉(zhuǎn)。從而獲得固形物,去除血漿,用水使固形物沉渣溶解。置血紅素于培養(yǎng)基中。為了使培養(yǎng)基酸化而使血紅素分子中的二價鐵血紅素和血球蛋白的結(jié)合體分離 預(yù)先制備好醋酸和氯化鈉的混合物 并將它加熱到90~110℃。混合時將固形物的溶血產(chǎn)品緩慢地增加到加熱的混合物中。從頭把溫度逐漸地升高到沸點,煮沸5~15分鐘,以便使結(jié)合體*分離,接著將混合物逐步冷卻到室溫。
為了使二價鐵血紅素溶解并消除,進口ELISA試劑盒在混合物中按溶物產(chǎn)品比值2∶1~5∶1增加yi醚。這時提取出來的蛋白質(zhì)呈白棉絮狀。將溶液過濾,再用yi醚清洗。
100毫升血中提取的蛋白質(zhì)產(chǎn)品相當于14.4克。使用這種辦法,每100毫升的血液可進步蛋白質(zhì)得率45