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一旦您在細胞培育的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成,首先,要肉眼觀察培育基是否混濁,然后,在鏡下觀察培育細胞生長的狀態(tài),黑點是否游動。假如細胞被污染,微生物則會大量繁衍,培育基就會迅速變黃、變混濁。污染包含細菌污染、支原體污染等。
假如在鏡下觀察細胞,生長狀態(tài)良好,與黑點呈現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么,黑點的呈現(xiàn)可能與以下幾種狀況有關(guān):
?(1)細胞生長過老,破碎的細胞殘骸;
(2)血清質(zhì)量不好,反復(fù)凍融的成果;
(3)制造培育基的pH值偏高,不宜細胞生長;
(4)制造培育基的水質(zhì)、容器不合格??蓱?yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑點;
(5)培育原代細胞中呈現(xiàn)小黑點,可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。
細胞培育中怎么防止黑點生成?
(1) 盡可能地減少血清凍融次數(shù)。
(2) 培育基無需37℃水浴。
(3) 培育基堅持*佳PH值7.0- 7.2。
(4) 嚴(yán)格控制制造培育基的水質(zhì),容器定時刷洗。
(5) 掌握細胞傳代的*佳時機,細胞切勿生長過老。