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    *人抗凝血酶-ⅢELISA檢測試劑盒

    發(fā)布時間: 2015/7/29  點擊次數(shù): 657次
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    本試劑僅供研究使用  標本:血清

    試驗原理:

    AT-III試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知AT-III濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將AT-III和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,人抗凝血酶-ⅢELISA檢測試劑盒然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中AT-III的濃度呈比例關(guān)系。

    洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

    操作步驟

    使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
    根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
    加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
    甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
    每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
    甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
    每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
    取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
    在450nm波長處測定各孔的OD值。

    局限

    6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到的結(jié)果。

    試劑盒性能

    1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。人抗凝血酶-ⅢELISA檢測試劑盒稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。

    2. 特異性:不與其它細胞因子反應(yīng)。

    3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

    結(jié) 果 判 斷 與 分 析

    1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

    2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應(yīng)的AT-III標準品濃度為橫坐標(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的AT-III含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。

    3、檢測值范圍:0-40IU/ml

    4、敏感度: 0.1 IU/ml

    RC073-5ug Recombinant Human I-TAC/CXCL11 (rHuI-TAC/CXCL11) 5ug
    RC074-5ug Recombinant Human Fractalkine/CX3CL1 (rHuFractalkine/CX3CL1) 5ug
    RC075-2ug Recombinant Human MCP-2/CCL8 (rHuMCP-2/CCL8) 2ug
    RC076-5ug Recombinant Human MCP-4/CCL13 (rHuMCP-4/CCL13) 5ug
    RC077-5ug Recombinant 人抗凝血酶-ⅢELISA檢測試劑盒Human MIP-5/CCL15 (rHuMIP-5/CCL15) 5ug
    RC078-5ug Recombinant Human LEC/NCC-4 (CCL16) (rHu LEC/NCC-4/CCL16) 5ug
    RC079-2ug Recombinant Human MIP-4/CCL18 (rHuMIP-4/CCL18) 2ug
    RC080-5ug Recombinant Human MIP-3 alpha/CCL20 (rHuMIP-3a/CCL20) 5ug
    RC081-2ug Recombinant Murine SDF-1 beta /CXCL12 (rMuCXCL12) 2ug

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