大鼠C-反應(yīng)蛋白(CRP)酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒采用的是生物素雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定樣品中大鼠C-反應(yīng)蛋白(CRP)水平。向預(yù)先包被了大鼠C-反應(yīng)蛋白(CRP)克隆抗體的酶標(biāo)孔中加入大鼠C-反應(yīng)蛋白(CRP),溫育;溫育后,加入生物素標(biāo)記的抗CRP抗體。再與鏈霉親和素-HRP結(jié)合,形成免疫復(fù)合物,再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶,然后加入底物A、B,產(chǎn)生藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺與樣品中大鼠C-反應(yīng)蛋白(CRP)的濃度呈正相關(guān)。 1. 從2-8℃取出的試劑盒,大鼠C-反應(yīng)蛋白(CRP)酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。 2. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差 3. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn). 4. 為避免交叉污染,要避免重復(fù)使用手中的吸頭和封板膜。 5. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。 6. 底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。 洗板方法 手工洗板方法:甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。 自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中 標(biāo)本要求 1.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。 2.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 操作程序總結(jié): 檢測(cè)范圍:50 ug/L→1600 ug/L。 大鼠C-反應(yīng)蛋白(CRP)酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒保存:2-8℃。 有效期:6個(gè)月(2-8℃)。 |