人甲狀旁腺激素相關蛋白ELISA 檢測試劑盒試劑盒
發(fā)布時間: 2016/4/25 點擊次數: 644次
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人甲狀旁腺激素相關蛋白ELISA 檢測試劑盒試劑盒試驗原理: PTHrP試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知PTHrP濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將PTHrP和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中PTHrP的濃度呈比例關系。 人甲狀旁腺激素相關蛋白ELISA 檢測試劑盒試劑盒內容及其配制 自備材料 1.蒸餾水。 2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。 3.振蕩器及磁力攪拌器等。 人甲狀旁腺激素相關蛋白ELISA 檢測試劑盒安全性 1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。 2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。 3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。 操作注意事項 1.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。 2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。 3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。 4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。 5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。 6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。 7.底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。 8.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。 9.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。 樣品收集、處理及保存方法 1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。 3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。 4、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 人甲狀旁腺激素相關蛋白ELISA 檢測試劑盒試劑盒試劑盒性能 1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。 2. 特異性:不與其它細胞因子反應。 3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。 結果判斷與分析 1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值 2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的PTHrP標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的PTHrP含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。 3、檢測值范圍:0-400nmol/L 4、敏感度: 1.0 nmol/L |
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